在做ELISA實(shí)驗(yàn)的時候，所采集的標(biāo)本大多都需要稀釋后才能用來做實(shí)驗(yàn)。有的ELISA試劑盒里說明書上有寫標(biāo)本的稀釋比例，這樣您就可以直接通過比例進(jìn)行稀釋，由于沒有經(jīng)驗(yàn)可尋，造成新用戶出現(xiàn)無從下手的感覺，今天廠家就帶你去細(xì)細(xì)的了解下。
ELISA試劑盒標(biāo)本的稀釋標(biāo)準(zhǔn)：
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計算濃度時，稀釋了“N”倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300pg/ml，150pg/ml，75pg/ml，37.5pg/ml，18.5pg/ml，9pg/ml，4.5pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml(不要少于0.5ml)300pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則：
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl)，實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則：
臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl)，實(shí)際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。
