布魯氏菌病是一種亞急性或慢性的疾病,可造成多種動物發(fā)病,本質(zhì)上是一種動物疾病,特別是家畜易發(fā)病,由布魯氏菌屬的細菌引起發(fā)病,人類可作為宿主偶爾攜帶這類細菌。偏好與人畜共患病潛能特征有差異的細菌,主要為:羊布魯氏菌,豬布魯氏菌,流產(chǎn)布魯氏菌和犬布魯氏菌。
以基因工程表達布魯氏菌蛋白作檢測和捕獲抗原,采用“雙抗原夾心法”膠體金免疫技術(shù)設計,標記膠體金的抗原與樣本中特異性抗體形成復合物,復合物在NC膜爬行的過程中與被包被在檢測線上的抗原特異性結(jié)合而被固定和富集于檢測線,使檢測線顯紅色反應,以試劑檢測線顯色與否反應來判斷樣品是否存在布魯氏菌抗體。
布魯氏菌檢測試劑盒操作步驟:
1.從試劑盒中分別取出熒光反應液、陰性對照、陽性對照。
2.在室溫下溶解后,充分震蕩混勻,瞬時離心。
3.取出PCR八連管,放在PCR板上。
4.在PCR八連管內(nèi)分裝熒光反應液,分別向多個PCR管中加入提取好的樣品核酸,其余兩個管內(nèi)分別加入陰性對照和陽性對照。完成后蓋上管蓋,并在右上角做好標記。
5.將標記好的PCR八連管放入儀器震蕩混勻后瞬時離心,取出后拿起觀察有無氣泡。
6.打開熒光定量PCR儀器,將PCR八連管放入卡槽中,蓋上儀器。
7.點擊實驗程序,選擇新建實驗,點擊運行程序,并按照PCR八連管標記順序依次選擇孔位信息:待測樣本、陽性對照、陰性對照。
8.點擊開始按鈕,運行實驗。
9.實驗完成后,在屏幕查看實驗結(jié)果,點擊詳細數(shù)據(jù)可查看實驗數(shù)據(jù),進行數(shù)據(jù)回顧。