ELISA試劑盒在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本,及時(shí)儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
ELISA試劑盒標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)作的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)作損壞作用,然后導(dǎo)致假陰性作用。
凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留心,不要進(jìn)行劇烈振蕩,重復(fù)倒置混勻即可。
標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所構(gòu)成的的混濁或絮狀物時(shí),應(yīng)離心堆積后取上清查看。
一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)作非特異性攪擾。
血清標(biāo)本如是以無菌操作分別,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。
ELISA試劑盒要留心避免出現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有相似過氧化物的活性。
在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育過程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。
樣本的搜集及血清分別中要留心盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長,其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)作分解作用。